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真核蛋白表達細胞轉染方式有兩種:瞬時轉染和穩(wěn)定轉染,本文的主要介紹了兩者的定義和適用性及細胞轉染一般步驟,影響轉染效率的因素,幫助我們提高實驗的成功率。在哺乳動物細胞蛋白表達實驗,根據(jù)不同的實驗目的,將質粒導入細胞有兩種方法:瞬時轉染和穩(wěn)定轉染。細胞轉染是將外源基因導入真核細胞的過程。質粒、DNA、RNA將這些外源基因導入到真核細胞內并不容易,要跨越細胞膜的屏障進入細胞質。瞬時轉染瞬時轉染是指外源基因導入到細胞后得以表達,但是基因不整合到細胞的基因組上,因此不會隨著細胞的生長...
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人的一生中約有三分之一的時間都在睡覺,睡眠是整個動物界生存所必須的過程。有研究表明,動物在醒著的時候會受到一定程度的神經(jīng)系統(tǒng)損害,由此產(chǎn)生的受損基因和蛋白質,會在腦部堆積并引起疾病,而睡眠有助于修復這種損害并清除這些垃圾。也有實驗發(fā)現(xiàn),睡眠可以促進與學習和記憶鞏固相關的神經(jīng)塑性重組及突觸的生長。但我們目前對于神經(jīng)修復和重組在睡眠期間的相對作用,以及其在個體發(fā)育過程中是否會發(fā)生變化仍不清楚。近日,來自英國帝國理工大學、美國加利福尼亞大學以及德克薩斯大學的研究團隊在《Scienc...
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美國R&DSystems試劑盒其基本方法是將已知的抗原或者抗體吸附在固相載體表面,并保持其免疫活性。然后抗原或抗體與某種酶連接成酶標抗原或抗體,這種酶標抗原或抗體既保留其免疫活性,美國R&DSystems試劑盒盒又保留酶的活性。在測定時,把受檢標本(測定其中的抗體或抗原)和酶標抗原或抗體按不同與固相載體表面的抗原或抗體起反應。美國R&DSystems試劑盒性能的重要性:①靈敏度:反映的是試劑盒檢出被檢物質的低量的能力,用戶可根據(jù)自己樣本中待檢指標的量選擇合適的試劑盒,如果待檢...
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R&DSystems擁有近30,000種產(chǎn)品,95%以上由自己研發(fā)生產(chǎn)。其產(chǎn)品包括細胞因子、ELISA試劑盒、生長因子、趨化因子、抗體、Animal-Free?蛋白、Luminex液相芯片、多因子檢測固相芯片、流式細胞分析與細胞篩選、干細胞及細胞培養(yǎng)等;覆蓋腫瘤、發(fā)育、糖生物、內分泌、免疫、神經(jīng)學、蛋白酶、信號傳導等學科研究領域;且每年有近2,000種新產(chǎn)品不斷問世,以滿足不同科研工作者的研究需要。美國R&DSystems試劑盒其基本方法是將已知的抗原或者抗體吸附在固相載體表...
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下面就一一介紹常用美國MatreyaLLC抗體純化方法及其相關原理。沉淀法硫酸銨/辛酸沉淀法是純化抗體傳統(tǒng)的方法之一,被廣泛用于血清和腹水抗體的濃縮和粗純,此方法可大規(guī)模粗純抗體,但純化后純度不高,還需配合其它方法繼續(xù)純化。通常是將飽和硫酸加入血清或腹水中,將抗體沉淀下來,然后在溶解沉淀繼續(xù)下一步的純化。辛酸沉淀抗體通常要先將腹水或血清的pH調4.8,然后緩慢的滴加辛酸,是蛋白沉淀,抗體在上清中,上清繼續(xù)下一步的純化。離子交換層析離子交換層析也常用于抗體的純化,通量大,工業(yè)上...
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